Farmacopeea Chineză (ediția 2020) cere ca extractul metanolic de YCH să nu fie mai mic de 20,0% [2], fără alți indicatori de evaluare a calității specificați. Rezultatele acestui studiu arată că conținutul extractelor de metanol din probele sălbatice și cultivate au îndeplinit ambele standarde din farmacopee și nu a existat nicio diferență semnificativă între ele. Prin urmare, nu a existat nicio diferență aparentă de calitate între probele sălbatice și cele cultivate, conform acelui indice. Cu toate acestea, conținutul de steroli totali și flavonoide totale din probele sălbatice a fost semnificativ mai mare decât cel din probele cultivate. Analiza metabolomică ulterioară a relevat o diversitate abundentă de metaboliți între probele sălbatice și cele cultivate. În plus, au fost eliminați 97 de metaboliți semnificativ diferiți, care sunt enumerați înTabelul suplimentar S2. Printre acești metaboliți semnificativ diferiți se numără β-sitosterolul (ID este M397T42) și derivații de quercetină (M447T204_2), care au fost raportați a fi ingrediente active. Printre metaboliții diferențiați au fost incluși și constituenți neraportați anterior, cum ar fi trigonelina (M138T291_2), betaină (M118T277_2), fustin (M269T36), rotenona (M241T189), arctiina (M557T165) și acidul loganic (M399T284_2). Aceste componente joacă diferite roluri în antioxidare, antiinflamatoare, eliminarea radicalilor liberi, anti-cancer și tratarea aterosclerozei și, prin urmare, ar putea constitui componente active presupuse noi în YCH. Conținutul de ingrediente active determină eficacitatea și calitatea materialelor medicinale [7]. În rezumat, extractul de metanol, ca singur indice de evaluare a calității YCH, are unele limitări, iar markerii de calitate mai specifici trebuie explorați în continuare. Au existat diferențe semnificative în ceea ce privește sterolii totali, flavonoidele totale și conținutul multor alți metaboliți diferențiați între YCH sălbatic și cultivat; deci, au existat potențial unele diferențe de calitate între ele. În același timp, ingredientele active potențiale recent descoperite în YCH ar putea avea o valoare de referință importantă pentru studiul bazei funcționale a YCH și dezvoltarea ulterioară a resurselor YCH.
Importanța materialelor medicinale autentice a fost recunoscută de mult timp în regiunea specifică de origine pentru producerea de medicamente pe bază de plante chinezești de calitate excelentă.
8]. Calitatea înaltă este un atribut esențial al materialelor medicinale autentice, iar habitatul este un factor important care afectează calitatea acestor materiale. De când YCH a început să fie folosit ca medicament, a fost mult timp dominat de YCH sălbatic. După introducerea și domesticirea cu succes a YCH în Ningxia în anii 1980, sursa materialelor medicinale Yinchaihu s-a mutat treptat de la YCH sălbatic la cultivat. Conform unei investigații anterioare asupra surselor YCH [
9] și investigația de teren a grupului nostru de cercetare, există diferențe semnificative în zonele de distribuție a materialelor medicinale cultivate și sălbatice. YCH sălbatic este distribuit în principal în regiunea autonomă Ningxia Hui din provincia Shaanxi, adiacent zonei aride a Mongoliei Interioare și Ningxia centrală. În special, stepa deșertică din aceste zone este habitatul cel mai potrivit pentru creșterea YCH. În schimb, YCH cultivat este distribuit în principal în sudul zonei de distribuție sălbatică, cum ar fi județul Tongxin (Cultivat I) și zonele sale învecinate, care a devenit cea mai mare bază de cultivare și producție din China, și județul Pengyang (Cultivat II) , care se află într-o zonă mai sudică și este o altă zonă producătoare de YCH cultivat. Mai mult, habitatele celor două zone cultivate de mai sus nu sunt stepe deșertice. Prin urmare, pe lângă modul de producție, există și diferențe semnificative în habitatul YCH sălbatic și cultivat. Habitatul este un factor important care afectează calitatea materialelor medicinale pe bază de plante. Diferitele habitate vor afecta formarea și acumularea metaboliților secundari în plante, afectând astfel calitatea medicamentelor.
10,
11]. Prin urmare, diferențele semnificative în conținutul de flavonoide și steroli totali și expresia celor 53 de metaboliți pe care i-am găsit în acest studiu ar putea fi rezultatul gestionării terenului și al diferențelor de habitat.
Una dintre principalele moduri prin care mediul influențează calitatea materialelor medicinale este prin exercitarea de stres asupra plantelor sursă. Stresul moderat de mediu tinde să stimuleze acumularea de metaboliți secundari.
12,
13]. Ipoteza echilibrului de creștere/diferențiere afirmă că, atunci când nutrienții sunt în cantitate suficientă, plantele cresc în primul rând, în timp ce atunci când nutrienții sunt deficitari, plantele se diferențiază și produc mai mulți metaboliți secundari.
14]. Stresul de secetă cauzat de deficitul de apă este principalul stres de mediu cu care se confruntă plantele din zonele aride. În acest studiu, starea apei a YCH cultivat este mai abundentă, cu niveluri anuale de precipitații semnificativ mai mari decât cele pentru YCH sălbatic (aprovizionarea cu apă pentru Cultivated I a fost de aproximativ 2 ori mai mare decât pentru Wild; Cultivated II a fost de aproximativ 3,5 ori mai mare decât pentru Wild). ). În plus, solul din mediul sălbatic este sol nisipos, dar solul din terenul agricol este sol argilos. În comparație cu argila, solul nisipos are o capacitate slabă de reținere a apei și este mai probabil să agraveze stresul cauzat de secetă. În același timp, procesul de cultivare a fost adesea însoțit de udare, astfel încât gradul de stres de secetă a fost scăzut. YCH sălbatic crește în habitate naturale aride și, prin urmare, poate suferi un stres mai grav cauzat de secetă.
Osmoreglarea este un mecanism fiziologic important prin care plantele fac față stresului cauzat de secetă, iar alcaloizii sunt regulatori osmotici importanți la plantele superioare.
15]. Betainele sunt compuși alcaloizi cuaternari de amoniu solubili în apă și pot acționa ca osmoprotectori. Stresul cauzat de secetă poate reduce potențialul osmotic al celulelor, în timp ce osmoprotectorii păstrează și mențin structura și integritatea macromoleculelor biologice și atenuează eficient daunele cauzate de stresul cauzat de secetă asupra plantelor.
16]. De exemplu, sub stres de secetă, conținutul de betaină al sfeclei de zahăr și al Lycium barbarum a crescut semnificativ [
17,
18]. Trigonelina este un regulator al creșterii celulare și, în condiții de stres cauzat de secetă, poate prelungi durata ciclului celular al plantei, poate inhiba creșterea celulelor și poate duce la micșorarea volumului celular. Creșterea relativă a concentrației de substanțe dizolvate în celulă permite plantei să realizeze reglarea osmotică și să-și sporească capacitatea de a rezista stresului cauzat de secetă.
19]. JIA X [
20] a descoperit că, odată cu creșterea stresului cauzat de secetă, Astragalus membranaceus (o sursă de medicină tradițională chineză) a produs mai multă trigonelină, care acționează pentru a regla potențialul osmotic și a îmbunătăți capacitatea de a rezista stresului cauzat de secetă. S-a dovedit, de asemenea, că flavonoidele joacă un rol important în rezistența plantelor la stresul cauzat de secetă.
21,
22]. Un număr mare de studii au confirmat că stresul moderat de secetă a fost favorabil acumulării de flavonoide. Lang Duo-Yong și colab. [
23] au comparat efectele stresului cauzat de secetă asupra YCH prin controlul capacității de reținere a apei în câmp. S-a constatat că stresul cauzat de secetă a inhibat creșterea rădăcinilor într-o anumită măsură, dar în cazul stresului de secetă moderat și sever (40% capacitatea de reținere a apei de câmp), conținutul total de flavonoide din YCH a crescut. Între timp, în condiții de stres cauzat de secetă, fitosterolii pot acționa pentru a regla fluiditatea și permeabilitatea membranei celulare, pot inhiba pierderea de apă și pot îmbunătăți rezistența la stres.
24,
25]. Prin urmare, acumularea crescută de flavonoide totale, steroli totali, betaină, trigoneline și alți metaboliți secundari în YCH sălbatic ar putea fi legată de stresul de secetă de mare intensitate.
În acest studiu, analiza de îmbogățire a căii KEGG a fost efectuată asupra metaboliților care s-au dovedit a fi semnificativ diferiți între YCH sălbatic și cultivat. Metaboliții îmbogățiți i-au inclus pe cei implicați în căile metabolismului ascorbatului și aldaratului, biosintezei aminoacil-ARNt, metabolismului histidinei și metabolismului beta-alaninei. Aceste căi metabolice sunt strâns legate de mecanismele de rezistență la stresul plantelor. Printre acestea, metabolismul ascorbatului joacă un rol important în producția de antioxidanti din plante, metabolismul carbonului și azotului, rezistența la stres și alte funcții fiziologice.
26]; Biosinteza aminoacil-ARNt este o cale importantă pentru formarea proteinelor.
27,
28], care este implicată în sinteza proteinelor rezistente la stres. Atât căile histidinei, cât și ale β-alaninei pot spori toleranța plantelor la stresul mediului.
29,
30]. Acest lucru indică în continuare că diferențele de metaboliți dintre YCH sălbatic și cultivat au fost strâns legate de procesele de rezistență la stres.
Solul este baza materială pentru creșterea și dezvoltarea plantelor medicinale. Azotul (N), fosforul (P) și potasiul (K) din sol sunt elemente nutritive importante pentru creșterea și dezvoltarea plantelor. Materia organică din sol conține, de asemenea, N, P, K, Zn, Ca, Mg și alte macroelemente și oligoelemente necesare plantelor medicinale. Nutrienții excesivi sau deficitari sau proporțiile dezechilibrate ale nutrienților vor afecta creșterea și dezvoltarea și calitatea materialelor medicinale, iar diferitele plante au cerințe diferite de nutrienți.
31,
32,
33]. De exemplu, un stres scăzut de N a promovat sinteza alcaloizilor în Isatis indigotica și a fost benefic pentru acumularea de flavonoide în plante precum Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge și Dichondra repens Forst. În schimb, prea mult N a inhibat acumularea de flavonoide la specii precum Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis și Ginkgo biloba și a afectat calitatea materialelor medicinale.
34]. Aplicarea îngrășământului P a fost eficientă în creșterea conținutului de acid glicirizic și dihidroacetonă în lemn dulce din Ural.
35]. Când cantitatea aplicată a depășit 0,12 kg·m−2, conținutul total de flavonoide din Tussilago farfara a scăzut [
36]. Aplicarea unui îngrășământ P a avut un efect negativ asupra conținutului de polizaharide din medicina tradițională chineză rhizoma polygonati.
37], dar un îngrășământ K a fost eficient în creșterea conținutului său de saponine [
38]. Aplicarea îngrășământului de 450 kg·hm−2 K a fost cea mai bună pentru creșterea și acumularea de saponină a Panax notoginseng în vârstă de doi ani.
39]. Sub raportul N:P:K = 2:2:1, cantitățile totale de extract hidrotermal, harpagid și harpagozid au fost cele mai mari [
40]. Raportul ridicat de N, P și K a fost benefic pentru a promova creșterea Pogostemon cablin și pentru a crește conținutul de ulei volatil. Un raport scăzut de N, P și K a crescut conținutul principalelor componente eficiente ale uleiului de frunze de tulpină Pogostemon cablin [
41]. YCH este o plantă sterilă tolerantă la sol și ar putea avea cerințe specifice pentru nutrienți precum N, P și K. În acest studiu, în comparație cu YCH cultivat, solul plantelor sălbatice YCH a fost relativ steril: conținutul solului de materie organică, N total, P total și K total au fost aproximativ 1/10, 1/2, 1/3 și, respectiv, 1/3 din cele ale plantelor cultivate. Prin urmare, diferențele de nutrienți din sol ar putea fi un alt motiv pentru diferențele dintre metaboliții detectați în YCH cultivat și sălbatic. Weibao Ma și colab. [
42] a constatat că aplicarea unei anumite cantități de îngrășământ N și îngrășământ P a îmbunătățit semnificativ randamentul și calitatea semințelor. Cu toate acestea, efectul elementelor nutritive asupra calității YCH nu este clar, iar măsurile de fertilizare pentru îmbunătățirea calității materialelor medicinale necesită studii suplimentare.
Medicamentele chinezești pe bază de plante au caracteristicile „Habitatele favorabile promovează randamentul, iar habitatele nefavorabile îmbunătățesc calitatea” [
43]. În procesul de trecere treptată de la YCH sălbatic la cultivat, habitatul plantelor s-a schimbat de la stepa aridă și sterilă a deșertului la terenuri agricole fertile, cu apă mai abundentă. Habitatul YCH cultivat este superior, iar randamentul este mai mare, ceea ce este de ajutor pentru a satisface cererea pieței. Cu toate acestea, acest habitat superior a dus la modificări semnificative ale metaboliților YCH; dacă acest lucru este propice pentru îmbunătățirea calității YCH și modul de a obține o producție de înaltă calitate a YCH prin măsuri de cultivare bazate pe știință va necesita cercetări suplimentare.
Cultivarea habitatului simulativ este o metodă de simulare a habitatului și a condițiilor de mediu ale plantelor medicinale sălbatice, bazată pe cunoașterea adaptării pe termen lung a plantelor la stresurile specifice ale mediului.
43]. Prin simularea diverșilor factori de mediu care afectează plantele sălbatice, în special habitatul original al plantelor utilizate ca surse de materiale medicinale autentice, abordarea folosește designul științific și intervenția umană inovatoare pentru a echilibra creșterea și metabolismul secundar al plantelor medicinale chinezești.
43]. Metodele urmăresc realizarea aranjamentelor optime pentru dezvoltarea materialelor medicinale de înaltă calitate. Cultivarea simulativă a habitatului ar trebui să ofere o modalitate eficientă de producție de înaltă calitate a YCH chiar și atunci când baza farmacodinamică, markerii de calitate și mecanismele de răspuns la factorii de mediu sunt neclare. În consecință, sugerăm ca măsurile de proiectare științifică și de gestionare a câmpului în cultivarea și producția de YCH să fie efectuate cu referire la caracteristicile de mediu ale YCH sălbatice, cum ar fi condițiile de sol arid, sterp și nisipos. În același timp, se speră, de asemenea, că cercetătorii vor efectua cercetări mai aprofundate asupra bazei materialelor funcționale și a markerilor de calitate ai YCH. Aceste studii pot oferi criterii de evaluare mai eficiente pentru YCH și pot promova producția de înaltă calitate și dezvoltarea durabilă a industriei.