Ulei pur de Saposhnikovia divaricata pentru lumânări și săpun, ulei esențial pentru difuzor, nou pentru difuzoare cu stuf

scurta descriere:

2.1. Pregătirea SDE

Rizomii SD au fost achiziționați ca plantă uscată de la Hanherb Co. (Guri, Coreea). Materialele vegetale au fost confirmate taxonomic de Dr. Go-Ya Choi de la Institutul Coreean de Medicină Orientală (KIOM). Un exemplar de voucher (număr 2014 SDE-6) a fost depus în Herbarul coreean al resurselor de plante standard. Rizomii uscați de SD (320 g) au fost extrași de două ori cu etanol 70% (cu un reflux de 2 ore) și extractul a fost apoi concentrat sub presiune redusă. Decoctul a fost filtrat, liofilizat și depozitat la 4°C. Randamentul extractului uscat din materii prime brute a fost de 48,13% (g/g).

2.2. Analiza cantitativă prin cromatografie lichidă de înaltă performanță (HPLC).

Analiza cromatografică a fost efectuată cu un sistem HPLC (Waters Co., Milford, MA, SUA) și un detector cu matrice de fotodiode. Pentru analiza HPLC a SDE, prim-O-standardul de glucosilcimifugin a fost achiziționat de la Institutul de Promovare din Coreea pentru Industria de Medicină Tradițională (Gyeongsan, Coreea) șisec-O-glucozilhamaudol și 4′-O-β-D-glucozil-5-O-metilvisaminolul a fost izolat în laboratorul nostru și identificat prin analize spectrale, în primul rând prin RMN și MS.

Probele SDE (0,1 mg) au fost dizolvate în etanol 70% (10 ml). Separarea cromatografică a fost efectuată cu o coloană XSelect HSS T3 C18 (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, SUA). Faza mobilă a constat din acetonitril (A) și acid acetic 0,1% în apă (B) la un debit de 1,0 ml/min. A fost utilizat un program de gradient în mai multe etape, după cum urmează: 5% A (0 min), 5-20% A (0-10 min), 20% A (10-23 min) și 20-65% A (23-40 min). ). Lungimea de undă de detecție a fost scanată la 210-400 nm și înregistrată la 254 nm. Volumul de injectare a fost de 10,0μL. Soluțiile standard pentru determinarea a trei cromoni au fost preparate la o concentrație finală de 7,781 mg/mL (prim-O-glucosilcimifugin), 31,125 mg/mL (4′-O-β-D-glucozil-5-O-metilvisaminol) și 31,125 mg/mL (sec-O-glucosylhamaudol) în metanol și păstrat la 4°C.

2.3. Evaluarea activității antiinflamatoriiIn vitro

2.3.1. Cultura celulară și tratarea probelor

Celulele RAW 264,7 au fost obținute din American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, SUA) și crescute în mediu DMEM care conține 1% antibiotice și 5,5% FBS. Celulele au fost incubate într-o atmosferă umidificată de 5% CO2 la 37°C. Pentru a stimula celulele, mediul a fost înlocuit cu mediu DMEM proaspăt și lipopolizaharidă (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, SUA) la 1μg/mL a fost adăugat în prezența sau absența SDE (200 sau 400μg/mL) pentru încă 24 de ore.

2.3.2. Determinarea oxidului nitric (NO), a prostaglandinei E2 (PGE2), a factorului de necroză tumorală-α(TNF-α), și producția de interleukin-6 (IL-6).

Celulele au fost tratate cu SDE și stimulate cu LPS timp de 24 de ore. Producția de NO a fost analizată prin măsurarea nitriților folosind reactivul Griess conform unui studiu anterior [12]. Secreția citokinelor inflamatorii PGE2, TNF-α, iar IL-6 a fost determinată folosind un kit ELISA (sisteme de cercetare și dezvoltare) conform instrucțiunilor producătorului. Efectele SDE asupra producției de NO și citokine au fost determinate la 540 nm sau 450 nm folosind un Wallac EnVision™cititor de microplăci (PerkinElmer).

2.4. Evaluarea activității antiosteoartriteiIn Vivo

2.4.1. Animale

Șobolani masculi Sprague-Dawley (în vârstă de 7 săptămâni) au fost achiziționați de la Samtako Inc. (Osan, Coreea) și găzduiți în condiții controlate cu un ciclu lumină/întuneric de 12 ore la°C și% umiditate. Șobolanii au primit o dietă de laborator și apăad libitum. Toate procedurile experimentale au fost efectuate în conformitate cu ghidurile National Institutes of Health (NIH) și aprobate de Comitetul pentru îngrijirea și utilizarea animalelor din cadrul universității Daejeon (Daejeon, Republica Coreea).

2.4.2. Inducerea OA cu MIA la șobolani

Animalele au fost randomizate și repartizate în grupuri de tratament înainte de începerea studiului (pe grup). Soluție MIA (3 mg/50μL de ser fiziologic 0,9%) a fost injectat direct în spațiul intraarticular al genunchiului drept sub anestezie indusă cu un amestec de ketamina și xilazină. Șobolanii au fost împărțiți aleatoriu în patru grupuri: (1) grupul cu soluție salină fără injectare MIA, (2) grupul MIA cu injecție MIA, (3) grupul tratat cu SDE (200 mg/kg) cu injecție MIA și (4 ) grupul tratat cu indometacină (IM-) (2 mg/kg) cu injecție MIA. Șobolanii au fost administrați oral cu SDE și IM cu 1 săptămână înainte de injectarea MIA timp de 4 săptămâni. Doza de SDE și IM utilizată în acest studiu s-a bazat pe cele utilizate în studiile anterioare [10,13,14].

2.4.3. Măsurători ale distribuției de greutate a labei din spate

După inducerea OA, echilibrul inițial în capacitatea de susținere a greutății a labelor din spate a fost perturbat. Un tester de incapacitate (Linton instrumentation, Norfolk, Marea Britanie) a fost utilizat pentru a evalua modificările toleranței la greutate. Sobolanii au fost plasati cu grija in camera de masurare. Forța de susținere a greutății exercitată de membrul posterior a fost mediată pe o perioadă de 3 s. Raportul de distribuție a greutății a fost calculat prin următoarea ecuație: [greutate pe membrul posterior drept/(greutate pe membrul posterior drept + greutate pe membrul posterior stâng)] × 100 [15].

2.4.4. Măsurătorile nivelurilor serice de citokine

Probele de sânge au fost centrifugate la 1500 g timp de 10 minute la 4°C; apoi serul a fost colectat și păstrat la -70°C până la utilizare. Nivelurile de IL-1β, IL-6, TNF-αși PGE2 din ser au fost măsurate folosind kituri ELISA de la R&D Systems (Minneapolis, MN, SUA) conform instrucțiunilor producătorului.

2.4.5. Analiză RT-PCR cantitativă în timp real

ARN-ul total a fost extras din țesutul articulației genunchiului folosind reactivul TRI® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, SUA), transcris invers în ADNc și amplificat prin PCR folosind un kit TM One Step RT PCR cu SYBR verde (Applied Biosystems) , Grand Island, NY, SUA). PCR cantitativă în timp real a fost efectuată utilizând sistemul Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR (Applied Biosystems, Grand Island, NY, SUA). Secvențele primerului și secvența sondă sunt prezentate în tabel1. Alicote de probă de ADNc și o cantitate egală de ADNc GAPDH au fost amplificate cu amestecul principal TaqMan® Universal PCR care conține ADN polimerază conform instrucțiunilor producătorului (Applied Biosystems, Foster, CA, SUA). Condițiile PCR au fost 2 minute la 50°C, 10 minute la 94°C, 15 s la 95°C și 1 min. la 60°C timp de 40 de cicluri. Concentrația genei țintă a fost determinată folosind metoda comparativă Ct (numărul ciclului prag la punctul de încrucișare între graficul de amplificare și pragul), conform instrucțiunilor producătorului.

Pret FOB:0,5 USD - 9.999 USD / bucată

Cantitate min.comandă:100 bucată/buc

Capacitate de aprovizionare:10000 bucăți/bucați pe lună

Trimiteți-ne un e-mail

Detaliu produs

Etichete de produs

Osteoartrita (OA) este cea mai frecventă afecțiune musculo-scheletică și cea mai frecventă boală degenerativă a articulațiilor la vârstnici.1]. OA este o afecțiune cauzată parțial de leziuni, pierderea structurii și funcției cartilajului și dereglarea căilor proinflamatorii și antiinflamatorii.2,3]. Afectează în primul rând cartilajul articular și osul subcondral al articulațiilor sinoviale și duce la insuficiență articulară, ducând la durere la purtarea greutății, inclusiv mersul și statul în picioare.4].

Nu există un remediu pentru OA, deoarece este foarte dificil să restabiliți cartilajul odată ce acesta este distrus [5]. Scopurile tratamentului sunt ameliorarea durerii, menținerea sau îmbunătățirea mobilității articulațiilor, creșterea rezistenței articulațiilor și reducerea la minimum a efectelor invalidante ale bolii. Tratamentele farmacologice ale OA urmăresc reducerea durerii pentru a crește funcția articulară și calitatea vieții pacientului. Deși distrugerea cartilajului este evenimentul principal în OA, degradarea colagenului este incidentul fundamental care determină progresia ireversibilă a OA în asociere cu inflamația.6,7]. Tratamentele cu activitate antiinflamatoare și condroprotectoare sunt de așteptat să amelioreze durerea și să mențină integritatea matricei la pacienții cu OA.

Prin urmare, scăderea inflamației va fi probabil benefică în gestionarea OA. Studii recente sugerează roluri protectoare pentru resursele vegetale asupra progresiei OA, în ceea ce privește atenuarea inflamației condrocitelor și distrugerea ulterioară a cartilajului, prin capacitatea lor de a interacționa cu țesuturile asociate articulațiilor, rezultând în atenuarea durerii articulare.8].

Rădăcina luiSaposhnikovia divaricataSchischkin (Umbelliferae) a fost utilizat pe scară largă în medicina tradițională pentru tratamentul durerilor de cap, durerii, inflamației și artritei în Coreea și China.9,10]. Diversele efecte farmacologice aleSaposhnikovia divaricata(SD) includ, de asemenea, proprietăți antiinflamatorii, analgezice, antipiretice și antiartritice [9,11]. Un studiu recent a demonstrat că extractul de cromon SD posedă efecte potențiale anti-artrita reumatoidă într-un model de șoarece de artrită indusă de colagen.10]; cu toate acestea, au fost efectuate puține studii pentru a susține activitatea antiinflamatoare și antiartritică aSaposhnikovia divaricataextract (SDE).

Prin urmare, studiul de față a investigat activitățile antiinflamatorii și antiosteoartrite ale unui extract cu etanol de 70% din SD. În primul rând, a fost evaluat efectul antiinflamator al SDEin vitroîn celulele RAW 264,7 induse de LPS. Apoi, efectul antiosteoartritei SDE a fost măsurat prin evaluarea distribuției suportate de greutate, a degradării cartilajului articular și a răspunsurilor inflamatorii într-un model de șobolan de OA indusă de iodoacetat de monosodiu (MIA).